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幾種評估小鼠精神Ji病的行為學實驗(大理石掩埋、筑巢、巢穴切碎實驗)


    在動物模型中模擬人類精神和神經發育障礙的各個方面是一項具有挑戰性的任務。盡管如此,小鼠已成為一種廣泛使用的模型系統,用于研究這些ji病的病理生理學和治liao策略。然而,相應的行為測試往往很復雜,需要豐富的行為測試經驗。在這里,我們提出了幾個簡單的檢測方案,即筑巢、巢切碎及大理石掩埋實驗,這可以作為具有精神ji病(潛在)特征的小鼠模型的行為表型分析的起點。


筑巢測試

  1. 在測試前至少 7 天單獨飼養小鼠。確保飼養條件滿足共同標準,例如受控照明( 12:12 小時明暗)、溫度和濕度以及低噪音水平、豐富的籠子環境以及隨意提供食物和水。測試可以在動物的標準住房室中進行,以確保小鼠zui大限度地熟悉它們的環境。

  2. 測試前 24 小時,從測試小鼠的籠子中取出任何筑巢材料。

  3. 避免任何可能在您的測試結果中引起偏差的設置(例如,在空間上分隔不同的測試組)。

  4. 在測試當天(推薦是晚上),為每只測試老鼠提供一個小窩。使用干凈的鑷子分發巢穴。

  5. 通過拍照記錄試驗開始時的狀態。

  6. 20 小時后,記錄現狀(“t20”)。注意不要打亂巢穴 。因此,避免動物的任何激動。因此,要拍照,請等到老鼠穩穩地坐在巢穴中(確保巢穴清晰可見)或自愿離開巢穴。不要強行將老鼠從巢中脫臼。確保記錄測試動物的識別信息(例如,通過在描繪巢穴之前描繪包括鼠標 ID 在內的籠子標簽)。

  7. 48 小時后,通過將測試小鼠移動到干凈的籠子來結束試驗。記錄完成的筑巢情況并避免使其混亂。


Nestlet 切碎測試


  1. 在測試前至少 7 天單獨飼養小鼠。確保飼養條件滿足共同標準,例如受控照明(在我們的案例中為 12:12 小時明暗)、溫度和濕度以及低噪音水平、豐富的籠子環境以及隨意提供食物和水。

  2. 測試前 24 小時,從測試小鼠的籠子中取出任何用于筑巢和環境富集的材料。

  3. 在測試當天,將測試動物轉移到測試區域。確保動物習慣于它們的環境以避免分心,例如不熟悉的氣味。這可以通過在房間的一個單獨空間中進行測試來實現,老鼠所在的房間就在其中。或者,在測試前的幾天讓小鼠習慣于測試區域,每天至少 1 小時。

  4. 從測試動物的籠子中取出食物和水,并用表面光滑的透明物體代替蓋子,例如(玻璃或有機玻璃)板,以防止老鼠在測試期間攀爬。

  5. 用鑷子取一個小窩,稱重并將其放入試驗動物的籠子中。

  6. 通過在試驗開始時拍照來確保文件。或者,可以使用自動視頻系統(例如,VisuTrack、SuperMaze 或類似系統)。確保記錄測試動物的識別信息(例如,通過在描繪巢穴之前描繪包括鼠標 ID 在內的籠子標簽)。

  7. 啟動計時器。在 30 分鐘的觀察期間,與測試區域保持至少 1m 的距離。

  8. 30 分鐘后,停止試驗并輕輕將試驗動物從籠子中取出。確保所有的巢材料都留在籠子里。

  9. 使用相機記錄試驗結束后的狀態(圖 1)。

  10. 取出燕窩并稱重。如果燕窩被撕成幾塊,請使用zui大的一塊。不要包括在移除巢穴過程中脫落的碎片,但不要故意試圖甩掉松散的材料。

  11. 將 Nestlet 存放在塑料袋中以備文件使用。不要忘記用鼠標 ID 標記袋子。

  12. 按順序測試動物時,在治liao組之間交替進行以避免分析中的偏差。


大理石掩埋實驗

動物在實驗前至少適應測試室 1 小時。為了隔離外部因素,所有實驗均在 130 × 80 × 80 cm 帶門的木箱內進行。6 毫米的高壓層壓墻內襯有隔音泡沫,以減少外部噪音的滲透。測試是在一個 26.6 × 42.5 × 18.5 cm 的籠子(Eurostand 1291H-type III H)中進行的,籠子放在一個高架的 10 毫米磨砂有機玻璃架子上。使用白色 LED 燈條從頂部和底部均勻照亮該設備,并使用 4.4-11 mm/F1.6ens (KOWA) 的高架相機以每秒 25 幀的速度記錄。


測試籠中裝有用于菌株 1-2 的木屑墊料和用于菌株 3 的玉米芯墊料,高度約為 4 厘米。下一個,20顆藍色玻璃彈珠均勻地分布在床上四排。在將動物放入籠子后立即開始錄制,使用定制的盆景腳本。讓動物探索該裝置 30 分鐘,然后將小鼠移出并拍攝自上而下的彈珠圖像。丟棄墊料,并在每次實驗之間用 70% 乙醇清潔籠子。





動物行為分析軟件:

1、VisuTrack軟件

2、SuperMaze軟件

3、FishTrack斑馬魚分析軟件

動物行為儀器:

1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機、各類經典迷宮等

2、動物抓撓分析儀、動物震顫行為分析儀、動物捕食行為分析儀

3、動物主動步態分析、動物被動步態分析、動物自由步態分析(內測中)

4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等

神經電生理:

1、光遺傳、無線光遺傳

2、光纖記錄系統(單通道、多通道)

3、電生理信號采集系統(腦電、肌電等)



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